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常見檢測細胞： **細胞（MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10）等，用孔徑為8μm的培養(yǎng)小室巨噬細胞、單核細胞 PMN：用孔徑為5μm的培養(yǎng)小室內(nèi)皮細胞（HUVEC）、白血病細胞 K562、骨髓瘤細胞HB124：用孔徑為 3μm或5μm的培養(yǎng)小室 具體操作： 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell?懸掛式細胞培養(yǎng)小室（cat#MCEP24H48）為例，實驗周期：3-5天 復(fù)蘇代數(shù)靠前的**細胞，在含有10%FBS的培養(yǎng)基中預(yù)先培養(yǎng)2-3代，待細胞匯合達到80%左右，饑餓處理18-24小時。 準備鋪膠： a) 4 °C融EMC膠過夜。 b) 將細胞小室、培養(yǎng)板和***頭等于4°C 預(yù)冷。高質(zhì)量的血清，保證您的實驗結(jié)果。徐匯區(qū)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)規(guī)格

主要優(yōu)點 ?兩種過濾裝置均有快速過濾的Millipore Express PLUS (PES)和**蛋白吸附的Durapore膜兩種材質(zhì)可選 ?過濾中培養(yǎng)基損失極小，回收率超高 ?0.mm孔徑的過濾裝置推薦用于去除支原體 Sterivex?過濾器 Sterivex?過濾器可以結(jié)合注射器、蠕動泵或壓力裝置使用，避免因傾倒或移液帶來的污染。 主要優(yōu)點 ?比較好處理100 mL-2 L ?可以直接過濾至幾乎任何接收容器 ?有多種高品質(zhì)膜類型可供選擇 不銹鋼平板式過濾器 ?根據(jù)不同的處理體積有90mm及142mm可供選擇 ?通過加壓過濾來清潔或消毒液體與氣體 ?特氟隆鍍面的支撐網(wǎng) ?可以將濾膜裝入后整體進行高壓消毒徐匯區(qū)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)規(guī)格上海益啟生物細胞檢測試劑盒的銷售電話。

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取上述200μL細胞液加入小室，下室（培養(yǎng)板）加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同，具體參考Millicell?產(chǎn)品說明書。37°C孵育24至72小時，依據(jù)**細胞類型而定。孵育結(jié)束，小心取出細胞小室，吸掉小室上層培養(yǎng)液，PBS清洗一遍，70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min，0.5%結(jié)晶紫（2%乙醇或PBS溶解）染色20min，然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料，立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞，自然靜置風(fēng)干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞，隨機選取不同的視野計數(shù)并算平均值。結(jié)晶紫溶解濾膜下層細胞，然后用33%醋酸脫色，將結(jié)晶紫完全洗脫下來，洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。徐匯區(qū)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)規(guī)格