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關閉真空。同樣，溶液將被吸收到印跡架中，并且表面可能看起來干燥。重要提示：孵育10分鐘后，再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘，直到框架完全空了。真空運行連續(xù)添加30 mL洗滌緩沖液（對于MultiBlot為15 mL）。重復洗滌步驟3次（共3次）4次洗滌）。12.關閉真空，然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點，并與適當?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白，則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育：一小時至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL（對于MultiBlot），5 mL（對于Mini blot）或10 mL（對于Midi blot）1X一抗（濃縮液）通常在標準免疫檢測過程中使用）。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話，將其從底座Merck樣本制備儀上海授權代理商。青浦區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器代理價

x @ -FAgo過濾器（或等效過濾器）建議在保溫瓶和真空源之間使用，例如o保護真空源免受污染?！駥⒄婵掌窟B接到真空源的真空管●前肢●封閉劑，例如脫脂/低脂干奶（0.5％以下），酪蛋白，牛血清白蛋白（BSA）或其他市售的封閉劑，例如blok * -CH緩沖液（請參閱表5）抗體（單克隆和/或多克隆），檢測試劑●洗滌緩沖液：Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液，pH 7.4，補充了Tween @ 20表面活性劑（TBST）或PBST）●轉移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸（厘米）多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般準則●如果蛋白質已經(jīng)轉移到已經(jīng)干燥的PVDF膜上，請用100％重新潤濕印跡甲醇，然后在組裝前用蒸餾水沖洗。如果蛋白質已轉移至硝酸纖維素膜干燥后，用蒸餾水重新青浦區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器代理價上海益啟生物電阻儀訂購方便。

中移出并在恒定的溫度下孵育顫抖。如果需要過度保溫，建議冷藏。雖然表面上的污點支架可能看起來部分干燥，印跡不會變干，因為溶液包含在框架中。注意：如果長時間處理多個印跡，則可以堆疊印跡固定框架減少工作空間。可選：如果要回收一抗，請先將抗體回收盤放入底座，然后再繼續(xù)執(zhí)行步驟4。4.延長孵育時間后，將框架放回底座上，卸下蓋子，然后按照步驟8進行操作。通用議定書第12條。注意：SNAP i.d不需要延長二抗的孵育時間。 2.0系統(tǒng)。建議使用5倍濃度的二抗，持續(xù)10分鐘。抗體回收1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5，但將真空時間增加到2分鐘，以確保所有的封閉溶液都已從框架的凹槽和通道中移除。2.從底座上取下印跡固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有殘留液體。紙巾。3.將抗體收集盤放入底座，確?？贵w上的定

盤，請在步驟5之后插入托盤。有關詳細信息，請參閱“抗體恢復”部分。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數(shù)量（對于MultiBlot為2.5毫升，對于迷你吸墨紙為5毫升，或10 mL用于Midi印跡）。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點固定器中，表面可能會變干。重要提示：請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在連續(xù)運行真空的情況下，添加30 mL洗滌緩沖液（MultiBlot為15毫升）。重復洗滌步驟3次以上（總共4次洗滌）。當框架完全為空時，將TURN真空關閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗（對于多印跡，為2.5 mL，5毫升用于迷你印跡，或10毫升用于Midi印跡）。在室溫下孵育10分鐘，然后上海益啟生物細胞跨膜電阻儀訂購方便。

測 注意：所有抗體均使用0.5％NFDM作為封閉劑和Luminata?Forte Western HRP進行測試作為化學發(fā)光試劑的底物。 印跡阻止 ?SNAPi.d.?2.0系統(tǒng)與比較常用的封閉劑兼容，包括脫脂/低脂干燥牛奶，牛血清白蛋白（BSA）和酪蛋白。許多其他市售阻滯劑也兼容（請參閱表5）。?為了確保比較佳的墨量通過吸墨架，必須完全封閉封閉液溶解且不含所有顆粒物質。在某些情況下，可能有必要降低封閉劑以達到所需的流量。?不建議使用濃度高于0.5％的脫脂/低脂干奶。?封閉劑應在含有0.1％Tween?20的tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液中制備表面活性劑，以降低表面張力并確保封閉劑在印跡架上均勻分布表面。?為確?？贵w在孵育步驟中均勻分布，請在封閉液中稀釋抗體，包含Tween?20表面活性劑。 如何使益啟生物公司帶您了解微流控細胞芯片分析儀詳情。青浦區(qū)MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器代理價

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